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用LiAc转化法进行酵母转化时，通常会通过加入Carrier DNA，选用对数期的酵母菌，以及优化质粒DNA的质量和浓度等方法来提高转化效率。在完成转化操作后，将转化产物用YPD Plus Liquid Medium重悬培养30～60分钟，有助于酵母细胞复苏，可以有效提高转化效率50～100%。适用于转化酵母菌株Y2HGold、AH109或Y187等，尤其适合对转化效率要求更高的文库转化。

我公司推出的三款转化试剂盒，转化效率为：经典转化Kit（KD0256）≈Super转化Kit（KD2195）＞快速转化Kit（KD2251），其中经典转化Kit转化效率可达10³～10⁵ cfu/μg，快速转化Kit转化效率可达经典转化效率的50～80%，转化产物增加YPD Plus复苏培养步骤，会在此基础上显著增加转化效率。

• 质粒转化：
  
  • 在含有约1μg质粒的1.5mL无菌离心管中，加入5μL预变性的Carrier DNA（KD2196），50μL酵母感受态细胞，350μL LiAc/PEG3350混合液（KD0803）轻柔混匀。
    
  • 30℃水浴或者金属浴30min，每10min轻柔上下颠倒混匀一次。
    
  • 每管加入20μL DMSO，轻柔上下颠倒混匀。
    
  • 42℃水浴热激15min，每5min轻柔上下颠倒混匀一次。
    
  • 3,000rmp离心5min，弃掉上清。
    
  • 菌体沉淀用1mL YPD Plus Liquid Medium重新悬浮，30℃摇床震荡培养30～60min。
    
  • 3,000rmp离心5min，弃掉上清，加入1mL无菌0.9% NaCl重悬菌体。
    
  • 分别稀释10倍，100倍后涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
    
  • 平板倒置30℃恒温培养3～5天。
• 文库转化：
  
  • 在含有约5～15μg文库质粒的15mL无菌离心管中，加入20μL预变性的Carrier DNA，600μL酵母感受态细胞，2.5mL LiAc/PEG3350混合液轻柔混匀。
    
  • 30℃水浴45min，每10min轻柔上下颠倒混匀一次。
    
  • 每管加入160μL DMSO，轻柔上下颠倒混匀。
    
  • 42℃水浴热激20min，每5min轻柔上下颠倒混匀一次。
    
  • 3,000rmp离心5min，弃掉上清。
    
  • 菌体沉淀用3mL YPD Plus Liquid Medium重新悬浮，30℃摇床震荡培养90min。
    
  • 3,000rmp离心5min，弃掉上清，根据实验需求加入相应体积的无菌0.9% NaCl重悬菌体。
    
  • 涂布于相应的缺陷型培养基平板上。
    
  • 平板倒置30℃恒温培养3～5天。